Κιτ Ταχείας Δοκιμής Ασφάλειας Τροφίμων για Ανίχνευση Εντεροαιμορραγικού Escherichia coli EHEC με Λυοφιλοποιημένο Αντιδραστήριο PCR Πραγματικού Χρόνου Χωρίς Απαίτηση Ψυχρής Αλυσίδας

1.Περιγραφή

Εντεροαιμορραγικό Escherichia coli(EHEC) είναι μια ομάδαE. coliστα στελέχη που μπορούν να προκαλέσουν αιμορραγική διάρροια και εντερίτιδα στον άνθρωπο, με τον οροτύπο O157: H7 να είναι το πιο αντιπροσωπευτικό στέλεχος.ακατέργαστο γάλα, πουλερικών και προϊόντων τους, καθώς και φρούτων και λαχανικών, με το βόειο κρέας να αποτελεί το κύριο μέσο μετάδοσης.

Το προϊόν αυτό είναι αντιδραστήρας PCR σε πραγματικό χρόνο που στεγνώνεται με ψύξηγια την ανίχνευσηΕλαιοκηλίδεςΟ157: H7. Χρησιμοποιεί τα πολύ διατηρημένα rfbE ΓενετικόΕλαιοκηλίδεςΟ157: H7 ως στόχο ανίχνευσης. Πρόκειται για ένα mastermix που περιέχει όλα τα απαραίτητα συστατικά, εκτός από το πρότυπο DNA, και προδιανέμεται ως ενιαία δοκιμή σε σωλήνες PCR για εύκολη χρήση.Το προϊόν αυτό δεν απαιτεί ψυχρή αλυσίδα για τη μεταφορά και την αποθήκευση, η οποία μειώνει σημαντικά το κόστος αποστολής και εξαλείφει πιθανές απώλειες λόγω σπατάλης αντιδραστηρίου και μόλυνσης από αερολύματα.

2. Ειδικές προδιαγραφές και σύνθεση

3. Αποθήκευση Και διάρκεια ζωής

Αποθήκευσησε θερμοκρασία περιβάλλοντος (5-30°C). Είναι σταθερό για 12 μήνες.. Μόλις ανοίξει η συσκευασία κενού, φυλάξτε τα μη χρησιμοποιημένα προϊόντα στην προμηθευόμενη επανασφραγιστή πλαστική σακούλα με τα αποξηρατικά.καιστην τσάντα από αλουμινένιο φύλλο. 

Προσοχή: 

Η μείωση του σφαιριδίου αντιδραστήρα είναι ένδειξη της εισόδου υγρασίας στον σωλήνα και της υγρασίας του αντιδραστήρα.Οποιαδήποτε αντιδραστήρια με σημαντικά μικρότερο μέγεθος σφαιριδίων από το συνηθισμένο πρέπει να απορρίπτονται ή να υποβάλλονται σε δοκιμή με θετικό έλεγχο πριν από τη χρήση. για δοκιμή δειγμάτων.

4Απαιτείται πρόσθετος εξοπλισμός και αντιδραστήρες

1)Μέσο PCR σε πραγματικό χρόνο

2)Πιπεττκαι συμβουλές

3) ΕπενδύσειςΝουκλεάση-Δωρεάν νερό

4)Κιτ εκχύλισης νουκλεϊκού οξέος

5. Συμφωνούμενα συστήματα PCR σε πραγματικό χρόνο

ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600.

6. ΑΝΑΝΩΡΙΣΤΕΜΑΤΑ δείγματα

Προϊόντα εμπλουτισμού τροφίμων με ζωμό, εμετό, δείγματα διάρροιας κλπ.

7. ΕΠΙΔΡΟΠΗ ΕΠΙΔΡΟΠΗ

1)ΠυρηνικάΑκτλΕεκτόξευση

ΕκχύλισμαΔΝΤαπό δείγματα που χρησιμοποιούν κατάλληλο εξοπλισμό εξαγωγής.Συνιστάται ηΔΝΤελαύνεται με περίπου 100μl αποθέματος ασφαλείας ελαύσεως(ΤΕ ήΧωρίς νουκλεάση H₂Ο)στο τελικό στάδιο τηςεξόρυξη.Το καθαρισμένο νουκλεϊκό οξύ πρέπει να χρησιμοποιείται αμέσως ή να φυλάσσεται σε θερμοκρασία - 20°C.

2)Προετοιμασία θετικού ελέγχου

Ο θετικός έλεγχος μπορεί να αποθηκευτεί σε θερμοκρασία περιβάλλοντος πριν από την επανυδάτωση. έως και 12 μήνες.Είναι...πρέπει να επαναυδατώνεται πριν από τη χρήσηπροσθέτοντας250μlτου αποθέματος ασφαλείας TE ή nακατέργαστοH₂Ο,Χρησιμοποιήστε αμέσως ή αποθηκεύστεσε -20°C.

3) ΕπενδύσειςΠΡΣ σε πραγματικό χρόνοΜixΠαποζημίωση

Α) Ανοίξτε την συσκευασία κενού και αφαιρέστε την ταινία 8 σωλήνωνσΕλέγξτε αν η σφαίρα είναι στο κάτω μέρος του σωλήνα. (Μειώστε τον αριθμό των σωλήνων όπως απαιτείται αναπαραίτητο)Εάν οι προμηθευόμενοι σωλήνες δεν είναι συμβατοί με το όργανό σας, μεταφέρετε το σφαιρίδιο αντιδραστήρα σε έναν οπτικό σωλήνα συμβατό με το όργανό σας.

Β) Ανοίξτε τους σωλήνες και απορρίψτε το καπάκι (δεν είναι κατάλληλο για μηχανές PCR σε πραγματικό χρόνο) και προετοιμάστε το μείγμα αντίδρασης πάνω στον πάγο όπως παρατίθεται παρακάτω.

* Χωρίς νουκλεάση νερό μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως αρνητικό έλεγχο.

Γ)Η PCR καλύπτεται με κάλυκες (στριπές) κατάλληλες για PCR σε πραγματικό χρόνο.(δεν παρέχεται).

Δ) Στρογγυλοποιήστε τους σωλήνες σε χαμηλή ταχύτητα για 10 ~ 15 δευτερόλεπτα και φυγοκεντρώστε τους με 3000 στροφές ανά λεπτό για 20 δευτερόλεπτα και τοποθετήστε τους σε ένα όργανο PCR σε πραγματικό χρόνο.

4)Εγκατάσταση RT-PCR

Ορίστε ο όγκος αντίδρασης σε 25μl και η διαδικασία ενίσχυσης PCR ως εξής. φθορισμός σε 60 °C και επιλέξτε ΑΠΟΧΡΗΣ ως παθητική αναφορά.

5) ΕπενδύσειςΑποτελέσματαΑανάλυσηκαιΕγώ...Ερμηνεία