Κιτ Ταχείας Δοκιμής Ασφάλειας Τροφίμων Σχεδιασμένο για Κατεψυγμένα Αφυδατωμένα Αντιδραστήρια PCR Πραγματικού Χρόνου για Γρήγορη και Ευαίσθητη Ανίχνευση Παθογόνων Τροφίμων

LyoDt^® Αντιδραστήριο ανίχνευσης PCR σε πραγματικό χρόνο με λυοφιλοποίησηΑντιδραστήριο ανίχνευσης για Staphylococcus  aureus

Χρήση’s Εγχειρίδιο

1. ΠΕΡΙΓΡΑΦΗ

αρνητικό., ένα Gram-θετικό κοκκίο που ανήκει στο γένος Staphylococcus, είναι ένα διαδεδομένο παθογόνο που μεταδίδεται μέσω τροφίμων και είναι ικανό να παράγει εντεροτοξίνες που προκαλούν τροφική δηλητηρίαση. Αυτό το προϊόν είναι ένα λυοφιλοποιημένο αντιδραστήριο PCR σε πραγματικό χρόνογια την ανίχνευση τουαρνητικό.35 Χρησιμοποιεί το εξαιρετικά διατηρημένο NUC γονίδιο τουαρνητικό. ως στόχο ανίχνευσης. Είναι ένα mastermix που περιέχει όλα τα απαραίτητα συστατικά, εκτός από το πρότυπο DNA, και είναι προ-δοσομετρημένο ως single-test σε σωληνάρια PCR για εύκολη χρήση. Αυτό το προϊόν δεν απαιτεί ψυχρή αλυσίδα για μεταφορά και αποθήκευση, γεγονός που μειώνει σημαντικά το κόστος αποστολής και εξαλείφει πιθανές απώλειες από σπατάλη αντιδραστηρίων και μόλυνση από αεροζόλ.

2. ΠΡΟΔΙΑΓΡΑΦΕΣ & ΣΥΝΘΕΣΗ

3. ΑΠΟΘΗΚΕΥΣΗ ΚΑΙ ΔΙΑΡΚΕΙΑ ΖΩΗΣ

Αποθηκεύστε σε θερμοκρασία περιβάλλοντος (5-3010 δευτ.)35 Είναι σταθερό για έως και 12 μήνες35 Μόλις ανοιχτεί η συσκευασία κενού, αποθηκεύστε τα αχρησιμοποίητα προϊόντα στην παρεχόμενη επανασφραγιζόμενη πλαστική σακούλα με τα ξηραντικά, και στη σακούλα αλουμινίου. 

ΠΡΟΣΟΧΗ: 

Η μείωση του σωματιδίου του αντιδραστηρίου είναι ένδειξη διείσδυσης υγρασίας στο σωληνάριο και το αντιδραστήριο είναι υγρό. Οποιαδήποτε αντιδραστήρια με σημαντικά μικρότερο μέγεθος σωματιδίων από το συνηθισμένο θα πρέπει να απορρίπτονται ή να ελέγχονται με θετικό έλεγχο πριν από τη χρήση για τη δοκιμή δειγμάτων.   

4. ΑΠΑΡΑΙΤΗΤΟΣ ΕΠΙΠΛΕΟΝ ΕΞΟΠΛΙΣΜΟΣ & ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ

1) Όργανο PCR σε πραγματικό χρόνο

2) Πιπέτες και άκρα

Αποτέλεσμα Νουκλεάση-απελευθερωμένο νερό

4) Σετ εξαγωγής νουκλεϊκού οξέος

5. ΣΥΜΒΑΤΑ ΣΥΣΤΗΜΑΤΑ PCR ΣΕ ΠΡΑΓΜΑΤΙΚΟ ΧΡΟΝΟ

ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 960035

6. ΑΠΟΔΕΚΤΑ ΔΕΙΓΜΑΤΑ

Ζωμός εμπλουτισμού τροφίμων, εμετός, δείγματα διάρροιας κ.λπ.

7. ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑΣ

1) Νουκλεϊκό nalysis cid Extraction

Εξαγωγή DNA από δείγματα χρησιμοποιώντας ένα κατάλληλο κιτ εξαγωγής. Συνιστάται το DNA να εκλούεται με περίπου 100μl ρυθμιστικού διαλύματος έκλουσης (TE ή απελευθερωμένο από νουκλεάση H₂O) στο τελικό στάδιο της εξαγωγής. Το καθαρισμένο νουκλεϊκό οξύ θα πρέπει να χρησιμοποιηθεί αμέσως ή να αποθηκευτεί στους -20°C.

2) Προετοιμασία θετικού ελέγχου

Ο θετικός έλεγχος μπορεί να αποθηκευτεί σε θερμοκρασία περιβάλλοντος πριν από την ενυδάτωση για έως και 12 μήνες. Θα πρέπει να ενυδατωθεί πριν από τη χρήση προσθέτοντας 250 μl ρυθμιστικού διαλύματος TE ή nuclease-free H₂O, αναδεύεται με δίνη σε χαμηλή ταχύτητα για 15-20 δευτερόλεπτα και φυγοκεντρείται σε χαμηλή ταχύτητα για 15-20 δευτερόλεπτα. Χρησιμοποιήστε αμέσως ή αποθηκεύστε στους -2010 δευτ.35

2) PCR σε πραγματικό χρόνο Mix Preparation

A) Ανοίξτε τη συσκευασία κενού και βγάλτε τη λωρίδα των 8 σωληναρίωνs που περιέχει το αντιδραστήριο. Ελέγξτε ότι το σωματίδιο είναι στο κάτω μέρος του σωληναρίου (Κόψτε τον αριθμό των σωληναρίων όπως απαιτείται αν απαιτείται). Εάν τα παρεχόμενα σωληνάρια δεν είναι συμβατά με το όργανό σας, μεταφέρετε το σωματίδιο του αντιδραστηρίου σε ένα οπτικό σωληνάριο συμβατό με το όργανό σας.

B) Ανοίξτε τα σωληνάρια και απορρίψτε το(τα) καπάκι(α) (δεν είναι κατάλληλα για μηχανές PCR σε πραγματικό χρόνο) και προετοιμάστε το μείγμα αντίδρασης σε πάγο όπως παρακάτω.

* Το νερό χωρίς νουκλεάση μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως αρνητικός έλεγχος.

C) Καλύψτε το PCR χρησιμοποιώντας καπάκια (λωρίδες) κατάλληλα για PCR σε πραγματικό χρόνο(δεν παρέχονται).

D) Αναδεύστε τα σωληνάρια με δίνη σε χαμηλή ταχύτητα για 10~15 δευτερόλεπτα και φυγοκεντρήστε στα 3000rpm για 20 δευτερόλεπτα και τοποθετήστε τα σε ένα όργανο PCR σε πραγματικό χρόνο.

2) Ρύθμιση RT-PCR

Ρυθμίστε τον όγκο αντίδρασης στα 25μl και τη διαδικασία ενίσχυσης PCR όπως παρακάτω. Συλλέξτε τη φθορισμό FAM στους 60°C και επιλέξτε ΚΑΝΕΝΑ ως παθητική αναφορά. Βήμα

Αποτέλεσμα Analysis και Interpretation